مدل‌سازی ایمونوانفورماتیکی، ساخت پلاسمیدهای حامل اپی‌توپ‌های CTL ویروس هپاتیت C و بررسی اولیه ایمنی‌زایی آنها

Authors

  • روحوند, فرزین فرزین روحوند، انستیتو پاستور ایران، بخش هپاتیت و ایدز، بانک ژن نوترکیب
  • معمارنژادیان, آرش
  • آرش کیا, آرش بخش هپاتیت و ایدز، بانک ژن نوترکیب، انستیتو پاستور ایران
  • ابراهیمی, ملانیا
  • علیزاده, شهاده
  • متولی, فاطمه
Abstract:

زمینه و اهداف: تاثیرات سرکوب کنندگی برخی از کلیدی ترین پروتئین‌های ویروس هپاتیت c بر سیستم ایمنی و جهش سریع ویروس، توجه را به واحدهای ایمونوژن کوچک و پایدار جلب نمود. لذا، واکسن های مولتی اپی توپ به منظور تمرکز پاسخ ایمنی بر این واحدها معرفی شدند. ولی، به دلیل پاسخ ایمنی نسبتاً ضعیف علیه این واکسن ها، افزایش ایمنی زایی نیازمند تمهیدات بیشتری است. این مطالعه با هدف ساخت پلاسمیدهای حامل اپی‌توپ‌های CTL ویروس هپاتیت C به‌روش مدل سازی ایمونوانفورماتیک و تعیین اولیه ایمنی زایی آنها انجام شد. روش بررسی: یک اپی توپ H-2Dd و دو اپی‌توپ HLA-A*0201 از نواحی E2، E1 و core در HCV انتخاب شد و با ابزارهای ایمونوانفورماتیک برای بهترین ترادف آنالیز شد. توالی مولتی اپی توپ به روش SOEing-PCR ساخته شد و در ناقل pcDNA3.1+ کلون گردید. توالی های ارتقاء دهنده PADRE، سیگنال رتیکولوم آندوپلاسمیک (ER signal sequence: ERss) و HBsAg به انتهای '5 توالی مولتی اپی توپ متصل شد و بیان پلاسمیدها به صورت in-vitro به روش های RT-PCR، دات-بلات، وسترن-بلات و ایمونوفلورسانس بررسی شد. ارزیابی اولیه ایمنی‌زایی به صورت in-vivo با آزمایش ازدیاد حساسیت تاخیری (Delayed type hypersensitivity: DTH) انجام شد. نتایج با آزمون‌های Non parametric Mann-Whitney و ANOVA ارزیابی شدند. یافته ها: نتایج آزمایش‌های in-vitro، بیان پلاسمیدها را تائید کرد و ارزیابی‌های اولیه in-vivo، پردازش و عرضه اپی‌توپ H-2Dd را در موش BALB/c نشان داد. همچنین در حالیکه اثرات ارتقاء پاسخ برای ERss و PADRE نشان داده شدند، اتصال HBsAg تاثیری در افزایش پاسخ نداشت.نتیجه گیری: این مطالعه ارزش پیش بینی های ایمونوانفورماتیک و آزمایش DTH را، برای آنالیز اولیه واکسن-های داوطلب مولتی اپی‌توپی در موش‌های BALB/c، نشان داد. نتایج، تائید کافی برای بررسی بیشتر سازه های طراحی شده را در موش ترانس ژنیک (تراریخته) HLA-A2 فراهم می کند.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

مدل سازی ایمونوانفورماتیکی، ساخت پلاسمیدهای حامل اپی توپ های ctl ویروس هپاتیت c و بررسی اولیه ایمنی زایی آنها

زمینه و اهداف: تاثیرات سرکوب کنندگی برخی از کلیدی ترین پروتئین های ویروس هپاتیت c بر سیستم ایمنی و جهش سریع ویروس، توجه را به واحدهای ایمونوژن کوچک و پایدار جلب نمود. لذا، واکسن های مولتی اپی توپ به منظور تمرکز پاسخ ایمنی بر این واحدها معرفی شدند. ولی، به دلیل پاسخ ایمنی نسبتاً ضعیف علیه این واکسن ها، افزایش ایمنی زایی نیازمند تمهیدات بیشتری است. این مطالعه با هدف ساخت پلاسمیدهای حامل اپی توپ ها...

full text

بررسی ژنوتیپ ویروس هپاتیت C در بیماران همودیالیزی مبتلا به هپاتیت C در استان گیلان

زمینه: بیماران همودیالیزی در ریسک بالاتر ابتلا به عفونت هپاتیت (HCV) C می باشند. عفونت HCV یکی از عوامل افزایش دهنده موربیدیتی و مورتالیتی در بیماران همودیالیزی است. ژنوتیپ های مختلف HCV پاسخ های متفاوتی به درمان می دهند. هدف این مطالعه بررسی شیوع ژنوتیپ های HCV در بیماران همودیالیزی در استان گیلان می باشد.روش کار: تمامی بیماران مراجعه کننده به 11 مرکز همودیالیز استان طی سال 87 با روش نمونه گیر...

full text

فراوانی آنتی بادی ویروس هپاتیت A در مبتلایان هپاتیت B و C در ایران

Background: Superinfection of hepatitis A in chronic hepatitis B and C may worsen the course of disease. This study attempted to study frequency of hepatitis A virus antibodies in patients with hepatitis B and hepatitis C. Materials and methods: 115 hepatitis C and 56 hepatitis B patients who visited the Hepatitis Association of Hamedan province during 2004-2005 were enrolled. Hepatitis A viru...

full text

الگوهای جدید درمانی برای عفونت ویروس هپاتیت C

Hepatitis C virus (HCV) infection has affected approximately 180 million people across the world. In most cases, HCV-infection remains chronic, which expose patients at high risk of cirrhosis and hepatocellular carcinoma. The rates of disease incidence and mortality diminish as a result of successful treatment of HCV infection. Until the recent years, despite the associated toxicities and l...

full text

مروری بر روش های تشخیص آزمایشگاهی ویروس هپاتیت C

ویروس هپاتیت سی (HCV)باعث ایجاد بیماری های هپاتیت حاد،سیروز کبدی و هپاتوسلولار کارسینوما می شود.در این مقاله به طور خلاصه به بیماری زایی و بررسی روش های تشخیصی بر پایه تست های سرولوژیکی و تکنیک های مولکولی برای تشخیص و مدیریت عفونت ویروس هپاتیت سی بررسی می شود. پس از خواندن این مقاله باید بتوانید تست های آزمایشگاهی که برای تشخیص و مدیریت ویروس هپاتیت سی استفاده می شود را توصیف کنید و در ت...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 4  issue 4

pages  30- 40

publication date 2011-03

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Keywords

No Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023